黄连素通过NF-κB信号通路对TNF-α诱导的VEGF表达的影响

目的观察黄连素对肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）诱导的血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达的影响及探讨其可能机制。方法实验分两部分,第1部分：以10ng/mL的TNF-α分别作用人肝癌细胞（HepG2）0、12、24、48h;第2部分：分别以0、10、25、50μmol/L的黄连素预孵育HepG2细胞24h后,继续与TNF-α共孵育24h。MTT法检测黄连素对HepG2细胞增殖能力的影响;Real-time PCR检测各组细胞VEGF mRNA水平;Western blot检测各组细胞VEGF、IκBα、NF-κB p65蛋白表达;ELISA检测NF-κB的活性。结果黄连素对HepG2细胞生长的抑制能力呈浓度依赖性;TNF-α显著上调HepG2细胞中VEGF mRNA和蛋白表达且呈时间依赖性;黄连素显著下调TNF-α诱导的HepG2细胞中VEGF mRNA和蛋白表达且呈浓度依赖性;TNF-α显著下调IκBα表达且呈时间依赖性,上调NF-κB P65的表达及NF-κB活性且呈时间依赖性;黄连素显著上调IκBα表达且呈浓度依赖性,下调NF-κB P65的表达及NF-κB活性且呈浓度依赖性。结论 TNF-α在HepG2细胞中能上调VEGF的表达,而黄连素能下调由其诱导的VEGF表达,可能是通过NF-κB信号通路所介导的。