细胞外信号调节激酶1/2通路在Peroxiredoxin-1抑制转化生长因子-β_1诱导的I、III型胶原蛋白表达中的作用

目的探讨细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）在转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导的肺成纤维细胞合成Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白中的作用,及新型过氧化物酶Peroxiredoxin-1（Prx-1）对该作用的影响。方法体外培养肺成纤维细胞随机分为4组：对照组（0.4%血清）、TGF-β1组（5μg/L）、阴性转染组（TGF-β1＋阴性对照si RNA）和Prx-1 si RNA转染组（TGF-β1＋Prx-1 si RNA）。采用脂质体转染法转染si RNA,实时定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测转染后Prx-1 m RNA表达;Western blot检测Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白、ERK1/2及Prx-1表达;2,7-二氯荧光素二乙酸（DCFH-DA）检测活性氧（ROS）水平。结果 Prx-1 si RNA转染肺成纤维细胞后,Prx-1 m RNA表达明显降低,最大抑制率为92%。与对照组比较,TGF-β1组的Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白、ROS、磷酸化ERK1/2（p-ERK1/2）及Prx-1蛋白的表达水平均明显提高。与TGF-β1组比较,阴性转染组中的上述观察指标无明显变化,但Prx-1转染组的Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白、ROS、p-ERK1/2水平进一步提高,而Prx-1蛋白的表达被抑制。结论 TGF-β1能够诱导肺成纤维细胞生成ROS,并促进ERK1/2通路的激活,导致Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白合成增加,而Prx-1 si RNA可通过提高ROS水平进一步促进TGF-β1该作用。