Origin and Expression of Nsa CMS Candidate Restorer Gene: Origin and Expression of Nsa CMS Candidate Restorer Gene

根据同源序列法克隆的Nsa CMS候选恢复基因 PPR618 的序列，采用PCR方法在Nsa CMS不育系、恢复系、原始体细胞杂交亲本以及其他甘蓝型油菜品种中共克隆出22个同源序列。序列分析表明，野芥亲本野油18、甘蓝型油菜亲本中双4号各含有2个同源序列，而Nsa CMS 4个恢复系则分别含有3、1、1、1个同源序列。恢复系中候选恢复基因的序列与野芥亲本野油18的同源序列的一致性在93%以上，其中恢1、恢3和恢4中至少有一个同源序列与野油18的第一个同源序列完全相同，恢2中的同源序列与野油18的第2个同源序列完全相同；但与甘蓝型油菜的同源序列一致性均低于80%，说明候选恢复基因来源于新疆野芥，而不是甘蓝型油菜。除了原来的 PPR 618外，获得了3个来源于恢复系的新候选恢复基因。候选恢复基因在序列上与萝卜和矮牵牛的恢复基因一致性较高。半定量RT-PCR分析表明，候选恢复基因在恢复系中多个组织都有表达，但在根、茎中表达量特别少。随着营养器官到生殖器官的发育逐渐升高，候选恢复基因在恢复系中表达量最高的是雄性败育关键时期, 即1.5~2.5 mm的花蕾中，但不育系中的同源基因在茎中的表达量则相对高于其他组织。