多孔CPC 组织工程肋骨支架制备及BMSCs 在其表面增殖黏附的实验研究

目的 通过形态学观察、细胞黏附和细胞增殖实验观察多孔CPC 材料作为组织工程肋骨支架的可行性。 方法 取幼猪骨髓分离培养BMSCs 并传代，另自制5 mm × 5 mm × 5 mm 大小的多孔CPC 材料，micro-CT 观察孔径、孔隙率及羟基磷灰石（hydroxyapatite，HA）含量，并与人正常松质骨作对比。取24 孔培养板，于孔内置入多孔CPC 材料1 块，共15 块，调整第1 代BMSCs 浓度为6 × 105 个/mL，将细胞悬液150 μL 滴加到多孔CPC 材料上，置于孵育箱中复合培养4、12、24 h 后，收集细胞并计数，计算细胞黏附率；行倒置相差显微镜观察、MTT 法检测多孔CPC 材料表面BMSCs 的生长情况；扫描电镜观察接种BMSCs 7 d 的多孔CPC 材料，并与单纯多孔CPC 材料和正常人松质骨对比。 结 果 BM SCs 与多孔CPC 材料复合培养4、12、24 h 的细胞黏附率分别为28.00% ± 0.98%、46.70% ± 1.14%和48.50% ± 1.18%。MTT 法检测细胞与材料复合培养1、2、3、4、5、6 d 的吸光度（A）值分别为1.103 ± 0.214、1.557 ±0.322、1.920 ± 0.178、2.564 ± 0.226、2.951 ± 0.415 和3.831 ± 0.328，呈明显上升趋势。倒置相差显微镜下可见细胞生长旺盛，贴壁良好，未出现毒性反应。micro-CT 检查示多孔CPC 材料的孔径均衡，且互相连通，HA 含量为（1 101.222 8 ±0.618 4） mg/ ccm，孔隙率为70.26% ± 0.45%；人正常松质骨HA 含量为（1 072.552 3 ± 0.744 2）mg/ccm，孔隙率为72.82% ± 0.51%；两组比较差异无统计学意义（P gt; 0.05）。扫描电镜观察单纯多孔CPC 材料孔径与正常人松质骨孔径大小、结构相似，且互相连通；BMSCs 在多孔CPC 材料表面排列有序，细胞呈片状，部分呈簇状，细胞形态呈多边形，细胞间可见较多细胞间质。 结论 多孔CPC 材料结构和成分均接近正常人松质骨，BMSCs 在其表面生长良好，适合作为组织工程肋骨支架材料，但其对细胞的黏附性有待进一步改善。