基于Thiol-Click-COOH固相萃取的蟾蜍二烯内酯的类分离研究

本文建立了蟾蜍二烯内酯类化合物类分离的固相萃取(SPE)新方法, 通过新型材料Thiol-Click-COOH将蟾皮总样中的蟾蜍二烯内酯类化合物分成蟾毒配基类(AAUBs)和蟾蜍毒素类(AACBs). 首先, 通过高效液相色谱(HPLC)以台阶等度洗脱方式对SPE方法的可行性进行评估, 结果证明该方法可行; 其次, 通过200 mg的SPE小柱考察了添加剂、最大上样量及回收率. 结果发现, 添加少量醋酸有利于AACBs类化合物的保留, 最大上样量为3%, 回收率在96.6%~99.6%之间, 相对标准偏差为1.6%. 最后, 运用该方法对蟾皮中的蟾蜍二烯内酯总样进行了类分离. 淋洗液经高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)分析, 两类化合物被完全分离, 共得到组分AAUBs色谱峰24个, 组分AACBs色谱峰20个, 比总样色谱峰多出17个, 解决了两类成分在反相色谱上共流出的问题. 该方法淋洗液为乙醇-甲酸体系, 不含水和盐, 后处理方便.