Modulação de peroxirredoxinas em linhagem de células beta produtoras de insulina expostas à citocinas

Durante a instalacao do diabetes tipo 1 as celulas beta pancreaticas sao alvos do ataque pelo sistema de defesa do organismo. A morte das celulas beta, em geral por apoptose, e provocada por contato direto com celulas ativadas do sistema imune e por mediadores inflamatorios tais como: citocinas pro-inflamatorias, quemocinas e radicais livres. As citocinas pro-inflamatorias, como IL1-beta, TNF-alpha e IFN-gamma, produzem grande quantidade de ROS e RNS no interior das celulas beta e estas, por sua vez, possuem uma baixa defesa anti-oxidante enzimatica, principalmente ao que se refere as enzimas que degradam H2O2, como catalase e glutationa peroxidase. Tal combinacao resulta no surgimento de estresse oxidativo e morte celular. Adicionalmente, outro sistema de peroxidases, as PRDXs, tambem atuam na protecao das celulas beta contra o estresse oxidativo. Neste sentido, o estudo sobre a modulacao de PRDXs por agentes inflamatorios e de grande valia, a medida que se tenta descobrir novas vias intracelulares desencadeadas pelas citocinas e alternativas para suprir a vulnerabilidade das celulas beta pancreaticas ao estresse oxidativo. Para isso utilizamos linhagem de celulas beta produtoras de insulina RINm5F. Estas celulas foram expostas as citocinas pro-inflamatorias IL1-beta, TNF-alpha e IFN-gamma e a anti-inflamatoria IL-4 e a expressao das PRDXs foi analizada. Nossos resultados demonstram que IFN-gamma e TNF-alpha reduzem a expressao da PRDX6. Quando separadas, essas citocinas alteram somente a expressao proteica, atraves da ativacao de sistemas de proteolise, especialmente de calpainas e ubiquitina-proteassomo, e via ativacao da JNK/c-Jun. A pre-incubacao das celulas RINm5F com a citocina antiinflamatoria IL4, bloqueia os efeitos do TNF-alpha ou IFN-gamma sobre a expressao da PRDX6. Em conjunto, IFN-gamma e TNF-alpha reduzem tanto a expressao genica quanto proteica da PRDX6. As alteracoes transcricionais ocorrem, provavelmente, por acao sinergica de mais de uma via intracelular, neste caso, NFkB (ativado pelo TNF-alpha) e STAT1 (ativado pelo IFN-gamma), sendo necessaria a participacao dessas duas vias para a modulacao genica da PRDX6. A delecao dessa enzima aumenta a suceptibilidade das celulas RINm5F aos efeitos deleterios de IFN-gamma, TNF-alpha e H2O2, sugerindo funcao importante da PRDX6 na protecao das celulas beta ao estresse oxidativo. Abstract