应用E7多肽/HLA-DR8四聚体监测治疗前后肺结核患者外周血多肽特异性CD4~＋ T细胞的变化

目的监测治疗前及治疗6个月内各时间点肺结核患者外周血E7多肽特异性CD4＋T细胞及总CD4＋T细胞的变化。方法应用已有的果蝇S2恒定细胞株,分别表达、纯化获得2种生物素化E7/HLA-DR8（E7/HLA-DRB1＊08032和E7/HLA-DRB1＊0818）复合物单体,进而制备成相应四聚体,分别用2种四聚体与抗人CD4-FITC共染色,流式细胞分析检测治疗前以及规律抗结核治疗15、30、45、60、90、120、150、180 d肺结核患者外周血四聚体阳性（E7多肽特异性）CD4＋ T细胞及总CD4＋ T细胞,同时以健康成人对照者、非结核呼吸道感染患者外周血及脐带血作为研究对照。结果多数病例的外周血总CD4＋ T细胞在治疗前略低于正常水平,随着治疗开始很快升高并在短期内恢复至正常水平;但除治疗前组与脐带血差异有统计学意义（P〈0.05）外,治疗前后各组之间,以及治疗前组与健康成人、非结核呼吸道感染者之间的差异无统计学意义（P〉0.05）。治疗前以及规律抗结核治疗15、30、456、0 d内肺结核患者组外周血可检出高水平的四聚体阳性CD4＋ T细胞,与60 d后各组及3个对照组差异均有统计学意义（P〈0.01或P〈0.05）,2种四聚体之间的检测结果无统计学意义（P〉0.05）;肺结核患者外周血四聚体阳性CD4＋ T细胞在治疗前即有较高水平,治疗15~60 d后达到最高,一些患者中间有波动,以后开始逐渐降低甚至降至正常水平。结论多肽/HLA-DR四聚体可以用于监测治疗前后结核患者外周血多肽特异性CD4＋ T细胞的变化,配合总CD4＋ T细胞的检测,对于治疗期结核患者疾病发展和恢复的监测具有指导意义。