Mecanismos moleculares de la activación del gen de procolágeno alfa 1(i) por el hierro

En las enfermedades que cursan con aumento del deposito de hierro en los tejidos, el higado es el principal organo danado, y en el es caracteristica la fibrosis hepatica en ausencia de inflamacion. Los objetivos del presente trabajo han sido conocer los efectos de las sales de hierro sobre la expresion del gen del procolageno alfa1(I) y los mecanismos por lo que los producen. Con este fin, utilizamos cultivos confluentes de celulas estrelladas del higado tratados con sales de hierro. Este tratamiento provoco un aumento del grado de lipoperoxidacion celular, y una disminucion de los niveles de GSH intracelular. Ademas, estos cambios se asociaron con un aumento slectivo de la produccion de colageno respecto al total de proteinas sintetizadas. El pretratamiento de las celulas con antioxidantes inhibio los efectos de las sales de hierro sobre el gen de procolageno alfa1(I), indicando la posible mediacion del estres oxidativo en su efecto. Estudios paralelos sobre los efectos de las sales de hierro y del MDA, producto derivado de la lipoperoxidacion de membranas biologicas, indicaron que ambos factores estimulan el gen de colageno a nivel transcripcional. Los efectos positivos sobre el ARNm del colageno alfa1(I), fueron dependientes de la dosis y el tiempo y requerian la sintesis "de novo" de proteinas. La participacion de los aldehidos reactivos fue demostrada por el hecho de que inhibidores de la formacion de complejos aldehido-proteina (aductus), anulaban los efectos de las sales de hierro sobre el gen de procolageno alfa1(I). El efecto sobre el promotro del gen se estudio transfectando las celulas con el plasmido COLCATl, que contienen el promotor del gen de procolageno alfa1(I) murino unido al gen de la cloranfenicol acil transferasa. Tras realizar delecciones sucesivas del promotor, determinamos que el efecto de las sales de hierro y el MDA se ejercia a traves de la region comprendida entre