兔Perthes 病模型的建立及VEGF 表达的实验研究

【摘 要】 目的 建立兔Perthes 病模型并探讨Perthes 病程中股骨头局部VEGF 表达的变化及意义。 方 法 3 月龄新西兰大白兔24 只，体重1.6 ～ 1.8 kg。取16 只兔作为实验组，手术切断左侧圆韧带和股骨头支持带血供，建立兔Perthes 病模型；剩余8 只作为对照组，按照上述程序左侧股骨头进行手术，但不打开关节囊，保持股骨头正常血供。于术后1、2、4、8 周分别处死动物，取出股骨头，行大体观察、X 线片、组织学、VEGF 免疫组织化学染色和VEGF mRNA 原位杂交观察。 结果 实验组动物模型均制备成功，术后5 d 感染1 例，退出实验。大体观察：对照组各时间点股骨头未见坏死改变；实验组股骨头随时间延长逐渐粗糙、失去光泽，变小，可见塌陷。X 线片观察：术后1、2 周，两组股骨头无明显差异；4、8 周，实验组股骨头较对照组密度增高。对照组各时间点HE 染色均未见股骨头坏死及修复改变；实验组术后4、8 周可见血管及肉芽组织侵入，新骨形成，参与修复。免疫组织化学：对照组股骨头骺软骨中，肥大区表现出较高的VEGF免疫反应性（VEGF immunoreactivity，VEGF-IR），而增殖区VEGF-IR 却表现较低水平。术后1 周，实验组股骨头增殖区VEGF 阳性细胞率开始高于对照组，实验组股骨头肥大区VEGF 阳性细胞率明显减少。术后8 周，实验组股骨头整个骺软骨区均表现VEGF-IR，增殖区VEGF 阳性细胞率较对照组明显增加；坏死股骨头软骨内骨化中心修复重建，肥大区VEGF阳性细胞率较正常接近。术后1、2、4、8 周，实验组骺软骨增殖区VEGF 阳性细胞率与对照组比较均有统计学意义（P lt;0.01） ；术后1、2、4 周，实验组骺软骨肥大区VEGF 阳性细胞率与对照组比较均有统计学意义（P lt; 0.01）。原位杂交观察结果与免疫组织化学染色观察相似。缺血性坏死后，实验组肥大区VEGF mRNA 表达丧失，增殖区VEGF mRNA 表达升高。软骨内骨化中心修复重建后，实验组可见新形成的肥大区重新表达VEGF mRNA。 结论 VEGF 在坏死股骨头骺软骨促进血管发生、软骨内骨化中心的修复重建方面起关键的调节作用。