针对HSV-2 LAT ORF的siRNA在病毒潜伏激活中的作用

目的观察疱疹病毒2型潜伏相关转录子开放阅读框架（HSV-ZLATORF）在病毒潜伏感染激活中的作用。方法体外建立HSV-2潜伏感染及复发的神经细胞模型，对病毒在细胞中的潜伏和激发进行PCR验证及测序；设计针对LATORF的siRNA，激活诱导后转染SH．SY5Y细胞，检测转染前后LATORF的表达改变；制备HSV-2基因表达谱芯片，利用芯片分析抑制LATORF后病毒基因表达的改变。结果在人神经母细胞瘤细胞株SH．SY5Y上成功建立了HSV-2潜伏感染及激活的细胞模型，LAT、gG基因PCR扩增及电泳结果证实了病毒在细胞中的潜伏及激活；LATORF-siRNA转染细胞24、36、48h后，LATORFmRNA的表达水平分别降低了39％、51％和60％。基因芯片分析干扰后病毒基因表达，共有28个基因出现差异表达，其中24个基因下调，4个基因上调。结论LATORF在HSV-2潜伏感染激活中发挥了重作用，为下一步分析LAT在病毒潜伏激活中的调控机制奠定了基础。