绵羊β—乳球蛋白基因5′端及上游调控序列的PCR扩增的方法学研究

本文对绵羊β-乳球蛋白基因5′端及上游调控序列的PCR方法扩增进行了研究.经比较分析，将从羊血中提取的绵羊基因组DNA的模板用量定为4μl(0.4μg/μl),TaqDNA聚合酶用量为0.83μl(3u/μl),变性为94℃1min，退火为64℃1min，72℃延伸2min，循环次数为32次，获得的PCR产物经电泳检测，条带明亮，特异性高，大小为898bp.经序列分析发现，与已知基因组序列一致性达99%以上，可用于指导外源基因在转基因动物乳腺中表达.