Investigação in vitro e in vivo do efeito regenerativo na medula espinal na presença de fragmentos do nervo isquiático com adição dos óleos essenciais de hyptis suaveolens (l.) poit e croton blanchetianus baill

2020 
A medula espinal (ME) e afetada em casos de traumas diretos ou indiretos e alguns estudos apontam que os nervos perifericos induzem um ambiente propicio para regeneracao. Alem disso, varias plantas medicinais possuem metabolitos secundarios com atividades no Sistema Nervoso Central. Este estudo objetivou analisar o efeito regenerativo na ME in vitro e in vivo na presenca de fragmentos do nervo isquiatico (FGNI) com adicao dos oleos essenciais (OES) de Hyptis suaveolens (HS) e Croton blanchetianus (CB). As plantas de HS e CB foram submetidas ao processo de hidrodestilacao e a analise da composicao quimica foi feita por cromatografia gasosa e espectrometria de massas. Para a avaliacao da plasticidade na ME in vitro, celulas foram coletadas de ratos neonatos Wistar e cultivadas em 6 grupos: um controle (D-10) e os demais grupos com diferentes combinacoes de meio condicionado do nervo isquiatico (MCNI) e os OES de HS e CB. A morfometria celular foi avaliada apos 96 horas por microscopia de contraste de fases, sendo em seguida realizada a imunocitoquimica para GFAP, GAP-43, NeuN e a plasticidade analisada por Microscopia Eletronica de Varredura. Os grupos foram comparados estatisticamente atraves do teste de Tukey e Bonferroni (p<0,05). Assim, foi possivel avaliar a aderencia, o efeito plastico e trofico das celulas nos grupos cultivados em D-10 acrescidos dos OES, com alteracoes morfologicas mais visiveis quando comparados com os grupos controle. O OE de CB, especialmente, promoveu a manutencao da expansao das celulas, indicando sua acao na plasticidade das celulas da ME. Quanto a analise regenerativa na ME in vivo, foram utilizados 40 ratos Wistar e de 4 deles foi removido o nervo isquiatico (NI). Os 36 animais restantes foram submetidos a uma transeccao medular com 4 mm de espessura ao nivel toracico baixo e divididos em 6 grupos (n=6): no grupo 1 foi inoculado 10μl de solucao salina (5%) (SS); no grupo 2 FGNI mais 10μl de SS (SS + NI); no grupo 3 FGNI mais o OE de HS (HS + NI); no grupo 4 foi inoculado apenas o OE de HS; no grupo 5 FGNI mais o OE de CB (CB + NI) e no grupo 6 foi inoculado apenas o OE de CB. O desempenho dos membros posteriores foi avaliado por 12 semanas usando pontuacao do comportamento motor (BBB) e o deficit funcional ligado ao comportamento da pontuacao combinada (CBS) e os dados dos testes comportamentais dos grupos tratados foram comparados estatisticamente. Ocorreu recuperacao dos movimentos dos membros posteriores dos animais pertencentes aos grupos com o FGNI e com os OES quando comparados ao grupo SS e SS + NI. Entretanto, nos grupos com o OE de CB ocorreram resultados mais significativos e superioridade frente aos grupos com o OE de HS. Portanto, a combinacao de OES e nervos perifericos como o NI, in vitro e in vivo, proporcionou a plasticidade morfologica e a melhora da recuperacao funcional da ME.
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