siRNA沉默COX-2基因对骨肉瘤MG-63细胞凋亡和自噬的影响
2014
目的:探讨小干扰RNA(smallinterferingRNA,siRNA)抑制环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)基因的表达对骨肉瘤MG-63细胞凋亡和自噬的影响及其可能的机制。方法:将靶向COX-2基因的siRNA(COX-2siRNA)转染至骨肉瘤MG-63细胞后,FCM法检测其对细胞凋亡的影响,实时荧光定量PCR法检测细胞中COX-2、Bcl-2、微管相关蛋白1轻链3(microtubule—associatedprotein1lightchain3,LC3)和Beclin1mRNA的表达,蛋白质印迹法检测COX-2、Bcl-2和Beclin1蛋白的表达。结果:COX-2siRNA转染组MG-63细胞中COX-2mRNA和蛋白的表达水平明显低于阴性对照组(转染controlsiRNA)和空白对照组(未转染的MG-63细胞)(P〈0.05)。COX-2siRNA转染组MG-63细胞凋亡率明显高于阴性对照组和空白对照组(P〈0.05)。COX-2siRNA转染组MG-63细胞中抗凋亡因子Bcl-2mRNA及其蛋白的表达水平下调(P〈0.05),自噬相关因子LC3和Beclin1mRNA及Beclin1蛋白的表达水平上调(P〈0.05)。结论:沉默COX-2基因可以促进骨肉瘤MG-63细胞的凋亡和自噬。
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