miRNA-451通过MRP靶向调控胃癌细胞对5-Fu耐药性的机制研究

目的探讨miR-451通过下调耐药基因MRP表达，调控胃癌对5-Fu耐药的相关机制。 方法采用实时荧光定量PCR检测20对人胃癌组织及癌旁组织和胃癌细胞系中miR-451的相对表达量，根据患者对药物的反应进行分组并检测耐药组以及非耐药组miR-451的表达水平。构建plent-miR-451稳定过表达胃癌细胞系，通过荧光实时定量PCR检测胃癌细胞系miR-451过表达效率，CCK8法检测不同浓度5-Fu对细胞增殖活力的影响。生物信息学方法分析miR-451的靶基因，并通过荧光素酶实验验证。实时定量PCR以及Western blot检测miR-451对靶基因MRP mRNA和蛋白水平的影响。 结果miR-451在正常组织中表达量高于胃癌组织，在非耐药胃癌组织中高于耐药胃癌组织。过表达miR-451降低了胃癌细胞对5-Fu的耐受能力（P=0.0006）。生物信息学分析显示MRP为miR-451的靶基因，荧光素酶实验同时也证实MRP为miR-451的潜在靶基因。过表达miR-451可导致耐药基因MRP mRNA以及蛋白水平均显著降低（P=0.00069）。 结论过表达miR-451可下调耐药基因MRP表达，使肿瘤细胞对5-Fu耐药性降低。