Contribution à la lutte contre la Péripneumonie contagieuse bovine : typage moléculaire par MLVA et inactivation de gènes chez Mycoplasma mycoides subsp. mycoides Small Colony

Mycoplasma mycoides subsp. Mycoides Small Colony (MmmSC) est l'agent infectieux responsable de la peripneumonie contagieuse bovine (PPCB), une maladie causant des pertes majeures dans les elevages bovins. Alors que le risque de reemergence de cette maladie en Europe est une realite, celle-ci reste a l'etat endemique dans toute la region sub-saharienne de l'Afrique. La comprehension des modes de dissemination de la PPCB est essentielle pour controler la maladie. Les outils de typage, ne��cessaires au suivi des epidemies, sont pour l'instant insuffisants pour differencier precisement les souches de MmmSC, notamment celles d'origine europeenne. Nous avons developpe une methode de typage moleculaire basee sur l'etude de minisatellites polymorphes (MLVA ou Multilocus VNTR Analysis). Trois minisatellites selectionnes ont permis de repartir un echantiillonnage de 32 souches en 17 groupes. Les 14 souches europeennes testees sont reparties en 5 groupes, ce qui represente une amelioration de la sensibilite par rapport aux techniques existantes. La prophylaxie en Afrique repose principalement sur l'utilisation de souches vaccinales attenuees par passages ex vivo. Ces dernieres n'apportent qu'une protection limitee dans le temps et induisent parfois des effets secondaires indesirables. En vue de produire de nouveaux vaccins par inactivation de facteurs de virulence, nous avons mis au point une methode de mutagenese par transposition. Des banques de donnees ont ete obtenues et l'insertion du transposon dans les genes d'interet a ete demontree. Un mutant n'exprimant plus la lipoproteine majeure LppQ a ete caracterise. Enfin, une amelioration du transposon utilise permet maintenant d'envisager la production de mutants n'hebergeant plus de genes de resistance aux antibiotiques, ouvrant ainsi la voie a l'elaboration de souches vaccinales attenuees par genie genetique.