Self-assembly into functional amyloids of Aspergillus fumigatus hydrophobins

Les hydrophobines sont des proteines fongiques qui s'assemblent aux interfaces hydrophobes/hydrophiles ou air-eau (IHH) pour former des fibres amyloides fonctionnelles qui s'organisent en couches dont le caractere amphiphile determine leurs fonctions. Les spores du champignon pathogene opportuniste Aspergillus fumigatus sont couvertes d'une couche de bâtonnets constitues de fibres amyloides formes par l'hydrophobine RodA. Ce revetement hydrophobe facilite la dispersion des spores et les rend inertes vis a vis du systeme immunitaire humain. Deux proches homologues de RodA, RodB et RodC, sont aussi presents dans la paroi cellulaire des spores. Nous avons realise une etude comparative de l'auto-assemblage de ces trois proteines avec un accent particulier sur RodC. Nous avons montre que RodA-C necessitent d'une interface IHH pour s'assembler en fibres et mis en evidence l'importance de la nature de l'interface dans la morphologie de leurs assemblages. Nous avons observe une auto-inhibition de la fibrillation avec la concentration et montre que celle-ci est due a la saturation de l'interface air-eau. En etudiant l'effet de mutations ponctuelles sur les cinetiques de fibrillation de RodC, nous avons etabli des similitudes et des differences par rapport aux regions importantes pour la formation de fibres pour RodC et RodA, etudiee au prealable. La transition du monomere a l'etat amyloide est accompagnee d'une perte de regions desordonnees et un gain de feuillets intermoleculaires en accord avec les analyses par mutagenese dirigee, qui indiquent que des residus hydrophobes dans des regions flexibles du monomere sont impliques dans le squelette -croise des fibres.