Méthode de différenciation étendue entièrement automatisée basée sur les anticorps monoclonaux

L'invention concerne une methode utile de numeration de populations cellulaires dans un prelevement biologique, qui consiste a: mettre en reaction, dans un simple melange reactionnel, un echantillon, un premier anticorps marque avec un fluorochrome presentant un premier spectre d'emission, et un anticorps complementaire. Le premier anticorps se lie a un determinant antigenique exprime de maniere differentielle sur des leukocytes et des non-leukocytes. L'anticorps complementaire se lie a un determinant antigenique exprime de maniere differentielle sur des granulocytes ou des cellules myeloides murs ou jeunes, et est marque soit avec le premier fluorochrome, soit avec un fluorochrome complementaire presentant un spectre d'emission reconnaissable par rapport au premier spectre d'emission. Le melange reactionnel peut etre melange avec un colorant d'acide nucleique dont le spectre d'emission se chevauche avec le premier spectre d'emission ou le spectre d'emission complementaire. Le melange reactionnel peut etre traite avec un systeme lytique qui lyse de maniere differentielle les globules rouges non nuclees et conserve les leukocytes. Des populations de cellules hematologiques sont detectees et enumerees a l'aide d'au moins deux parametres (par fluorescence, optique et electrique) pour chaque population.