O papel do interferon do tipo I e sua sinalização na resposta imune inata contra a infecção pela Brucella abortus

Brucella abortus e uma bacteria Gram-negativa, patogeno intracelular facultativo, que causa febre ondulante e artrite em humanos e infertilidade em animais, resultando em serias perdas economicas. O reconhecimento de Brucella por PRRs, como os TLR2, TLR4 e TLR9, via molecula adaptadora MyD88, e importante para o estabelecimento de uma resposta imune eficiente e controle da infeccao. Estimulados por uma serie de novos trabalhos de imunidade inata relacionando a sinalizacao via IFN tipo I e a infeccao de bacterias intracelulares, este trabalho objetivou elucidar o papel da ativacao do sistema interferon do tipo I na resposta imune a infeccao pela B. abortus. Inicialmente determinamos que a B. abortus induz a producao de IFN-a e IFN-, sendo a producao de IFN- mais proeminente. Para acessar o papel da sinalizacao mediada pelo IFN-R, camundongos deficientes para este receptor foram infectados e o numero de bacterias viaveis recuperadas no baco destes animais foi inferior ao recuperado em baco de camundongos selvagens. Camundongos IFN-R-/- apresentaram um maior nivel de IFN- e NO assim como um menor indice apoptotico no baco. Associado a este fenotipo, o nivel de expressao do gene pro-apoptotico TRAIL se mostrou diminuido em BMMOs de camundongos IFN-R-/- e a sinalizacao mediada pela fosforilacao de STAT1- Tyr701 se mostrou inexistente nestas celulas. Para entender a ativacao do sistema de interferon do tipo I pela B. abortus o nivel de expressao de IFN- foi medido em BMMOs de camundongos TLR2-/-, TLR4-/-, TLR9-/- ou TRIF-/-, nao apresentando nenhuma diferenca quando comparadas com a expressao deste gene em celulas derivadas de camundongos selvagens. Contudo, a inducao de IFN- pela B. abortus foi dependente da molecula MyD88. Para entender o papel de IRF-3 na ativacao de interferon do tipo I, siRNAs para tal molecula foram utilizados se mostrando eficientes na diminuicao da expressao de IFN-. Algumas sinalizacoes intracelulares mediadas por receptores da imunidade inata que reconhecem acidos nucleicos culminam na ativacao do ativador transcricional IRF-3. Para determinar se o DNA da B. abortus seria um agonista capaz de induzir a expressao de IFN-, BMMOs foram estimulados com a bacteria viva ou com o DNA purificado. Os resultados obtidos neste trabalho sugerem que tanto a bacteria viva quanto o seu DNA purificado sao capazes de induzir a expressao de IFN- independente dos receptores TLR2, TLR4 ou TLR9, mas dependente da molecula adaptadora MyD88 e de IRF-3. Finalmente, este trabalho sugere que ao induzir a producao de IFN- e apoptose, a B. abortus e capaz de continuar seu processo infeccioso no hospedeiro escapando dos corpos apoptoticos atraves da fragmentacao das membranas celulares, ou mesmo utilizando os corpos apoptoticos como veiculo para infectar de maneira silenciosa outras celulas do hospedeiro restabelecendo o seu ciclo de infeccao