NF-κB p65 介导的前列腺素E2 分泌及DNA 结合抑制因子2蛋白表达在促进大鼠桡骨骨折早期愈合的作用

目的 骨再生过程包含一系列复杂的分子信号途径，通过探讨NF-κB 作为骨折愈合过程中“关键性激活点”的可能性，为基因治疗骨折延迟愈合和骨不连提供实验依据。 方法 取6 ～ 7 周龄Wistar 雄性大鼠33 只，体重180 ～ 220 g，随机分为4 组。对照组（A 组，n=3）、单纯NF-κB 抑制剂Bay 11-7082 处理组（B 组，n=6）：分别在大鼠右前肢桡骨中下段经皮注射0.3 mL 生理盐水或含50 μmol/L Bay 11-7082 的生理盐水，每天1 次，持续至处死。单纯骨折组（C 组，n=12）、Bay 11-7082 干预骨折组（D 组，n=12）：制备右侧桡骨中下段骨折模型后，C 组不作任何处理，D 组处理方法同B 组。观察大鼠一般情况，A 组于注射后7 d，B、C、D 组于注射后3、7 d 取标本行ALP 活性、前列腺素E2（prostaglandins E2，PGE2）含量检测以及Western blot 检测NF-κB p65、BMP-7 和DNA 结合抑制因子2（inhibitor of DNA binding 2，Id2），并取C、D 组14、28 d 标本行HE 染色观察。 结果 各组大鼠均存活至实验完成。注射后3、7 d B组ALP 活性及PGE2 含量与A 组比较，差异均无统计学意义（P gt; 0.05）；C 组较A 组增高，D 组较A 组降低，差异均有统计学意义（P lt; 0.01）。注射后3、7 d，各组骨折端组织中均见NF-κB p65、BMP-7、Id2 表达，B 组各因子表达水平与A 组比较，差异均无统计学意义（P gt; 0.05）；C 组NF-κB p65 和BMP-7 蛋白表达水平较A 组增高，Id2 蛋白表达水平较A 组降低，差异均有统计学意义（P lt; 0.01）；D 组NF-κB p65、BMP-7 蛋白表达水平较A 组降低，Id2 蛋白表达较A 组增高，差异均有统计学意义（P lt; 0.01）。组织学观察示，注射后14、28 d C 组骨折端组织见大量骨性骨痂，而D 组28 d 时才见骨性骨痂。 结 论 NF- κB p65 可通过调控PGE2 分泌以及BMP-7 和Id2 蛋白表达促进大鼠桡骨骨折的早期愈合。