应用胚胎干细胞试验（EST）评价邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）的胚胎毒性

目的利用小鼠胚胎干细胞试验（EST）模型,初步评价邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）的胚胎毒性。方法采用悬滴悬浮法培养小鼠胚胎干细胞（m ESCs）,观察受试物对m ESCs分化能力的影响,结合CCK-8法判断受试物对m ESCs及小鼠胚胎成纤维细胞（3T3）的细胞毒性结果,预测受试物的胚胎毒性。用已知强胚胎毒性化合物5-氟尿嘧啶（5-Fluorouracil,5-FU）、无胚胎毒性化合物青霉素-G（P-G）对模型进行有效性验证,并将经过验证的EST模型用于评价受试物DEHP的胚胎毒性。结果利用建立的EST模型对5-FU、P-G胚胎毒性进行评价,结果表明5-FU为强胚胎毒性,P-G为无胚胎毒性,与文献报道一致;DEHP对m ESCs和3T3的半数抑制浓度分别为IC50m ESCs=315μmol/L（126μg/ml）,IC503T3=307μmol/L（122.8μg/ml）,m ESCs的半数抑制分化浓度为ID50m ESCs=323μmol/L（129.2μg/ml）,经EST模型判断公式计算得出该化合物为弱胚胎毒性化合物。结论建立的EST模型的有效性验证结果与ECVAM的结论一致,可用于胚胎毒性的筛选和评价;经EST模型评价DEHP的胚胎毒性为弱胚胎毒性。