海藻酸裂解酶高产菌株 Microbulbifer sp.SH-1的分离、鉴定及其产酶条件优化

目的筛选一株海藻酸裂解酶高产菌株，并通过优化产酶条件提高海藻酸裂解酶活性。 方法以海藻酸钠为唯一碳源的培养基，对福建漳州滨海土壤中的微生物进行筛选和分离，获得海藻酸裂解酶高产菌株；依据形态、生理生化特征及16S rDNA序列分析对目的菌株进行鉴定；然后通过单因素和正交试验对其产酶条件进行优化。 结果十六烷基吡啶（CPC）染色得到4株透明圈与菌落直径比值（D/d）>3的菌株；DNS法测定4菌株发酵液中海藻酸裂解酶活力，其中菌株SH-1的海藻酸裂解酶活性最高，达到315.52 U/mL；经形态、生理生化和16S rDNA测序鉴定，将其命名为Microbulbifer sp.SH-1；通过单因素和正交试验优化，确定该菌株最适产酶培养基为：海藻酸钠10 g/L，NaCl 5 g/L，（NH4）2SO4 5 g/L，MgSO4 0.2 g/L，K2HPO4 1 g/L，FeSO4 0.02 g/L。对培养条件的进一步优化结果发现，在初始pH 7.5、温度32℃条件下，以1%的接种量将SH-1菌株接入50 mL优化培养基中，240 r/min转速下振荡培养24 h，SH-1菌株产酶最大活性可达757.90 U/mL，比优化前提高了2.4倍。 结论SH-1最佳产酶条件的建立，为海藻酸裂解酶的大规模制备以及更深层次研究提供了试验基础和理论依据