APLICAÇÃO DE BIOTECNOLOGIA NA PRODUÇÃO IN VITRO DE METABÓLITOS DO ANTI-HIPERTENSIVO LASSBIO 897

Introducao e objetivos: A biotransformacao, utilizando-se modelos microbianos, tem sido usada para elucidacao do metabolismo de farmacos e posterior preparacao in vitro de metabolitos. O composto LASSBio 897(um derivado N-acilidrazonico, o 3,4-metilenodioxbenzoil-3-tienilidrazona) foi sintetizado no Laboratorio de Avaliacao e Sintese de Substâncias Bioativas (LASSBio) da UFRJ. Devido potente atividade vasodilatadora, o LASSBio 897, e um promissor candidato a prototipo de farmaco anti-hipertensivo. Estudos farmacocineticos identificaram dois metabolitos no soro de caes. Este trabalho objetivou a preparacao in vitro destes metabolitos com utilizacao de fungos filamentosos. Metodologia: Os microrganismos Aspergillus alliaceus NRRL 315, Beauveria bassiana ATCC 7159, Cunninghamella echinulata ATCC 9244, Mortierela isabelina NRRL 1757 e Muccor plumbeus ATCC4740 foram selecionados como biocatalisadores. Apos o termino da reacao, purificacao em cromatografia de coluna, monitorada por HPLC-UV, e placa preparativa foi realizada. Varias condicoes de purificacao foram testadas de modo a promover maior rendimento. Resultados e discussoes: Beauveria bassiana ATCC 7159 e Cunninghamella echinulata ATCC 9244 foram as cepas mais promissoras, produzindo maior quantidade dos metabolitos desejados, o que pode ser observado por HPLC-UV. Dificuldades na purificacao a impediram a completa elucidacao estrutural dos metabolitos por Ressonância Magnetica Nuclear (RMN) devido a pequena quantidade obtida. Conclusao: Os fungos filamentosos mimetizam a producao dos metabolitos de mamiferos do LASSBio 897, entretanto os metodos cromatograficos classicos nao sao eficientes para total purificacao dos metabolitos do meio reacional. Novas metodologias de purificacao precisam ser desenvolvidas.