一个非催化区域缺失增加了一个β-酶的活性从Flammeovirga sp.my04ga sp. my04琼胶酶

2015 
糖苷水解酶(GH)通常包含一个催化模块和各种非催化区(NCR)。然而,在NCR的催化模块的影响大部分还不清楚除了碳水化合物结合模块(CBMS)。agag4是βGH16内的海洋菌Flammeovirga sp. my04琼胶降解酶。酶是由一个额外的糖结合肽在催化模块,不可预测的信任但功能在NCR的未知序列,这是酶序列的新特点。在这项研究中,我们删除了NCR的序列,表达截短的基因,agag4-t140一个140个氨基酸的肽的C-末端,在大肠杆菌中的表达。纯化和复性后,trtmcated琼胶酶的ragag4-t140保留相同的催化温度和pH值ragag4。结合荧光标记,高效液相色谱法和质谱技术,我们确定的ragag4-t140作为新琼脂四糖和neoagarohexaose琼脂糖降解最终产物,随着1.53:1最终摩尔比和大约70%的转化率,这是类似于那些ragag4。然而,ragag4-t140截断琼胶酶显著降低蛋白质溶解度的15倍和35倍的增加,酶活性。对ragag4-t140低聚糖生产的,ragag4产生等摩尔重量约25倍。这项研究提供了一些见解的NCR对琼胶酶的生化特性和agag4意味着提高GH酶性质的一些新策略。
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