草鱼（Ctenopharyngodonidellus）NCCRP-1基因的克隆和原核表达

应用RACEPCR克隆了草鱼NCCRP—1基因。结果表明，NCCRP—JcDNA全长900bp，开放阅读框为714bp，编码237个氨基酸残基，预测分子量为27．3kD，理论等电点为5．63。草鱼NCCRP-1具有NCCRP-1蛋白家族保守的功能区域，与鲤鱼该基因（Cyprinuscarpio L．）的相似性为88％。将此基因定向插入原核表达载体pET-32a，构建重组质粒pET-NccRP后转化BL21（DE3）进行诱导表达。SDS．PAGE分析显示在47．8kD处出现特异性蛋白条带，Westernblot检测表明草鱼NCCRP-1融合蛋白成功表达。