Étude des caractéristiques fonctionnelles et métaboliques des cellules souches du sang périphérique en homéostasie̊–̊approche «̊side population »

Malgre la disponibilite et la facilite d’acces des cellules souches hematopoietiques (CSH) du sang peripherique en homeostasie (SpH), elles sont peu etudiees et utilisees pour la recherche ou la therapie cellulaire. Afin de mieux les exploiter, nous tentons de les cibler directement par une approche directe appelee «  side population (SP) ». Ainsi, nous avons etudie les proprietes fonctionnelles (proliferation, production de progeniteurs, capacite de greffe) et metaboliques (incorporation de glucose, masse et activite mitochondriales) des cellules SP issues de la fraction CD34 + du SpH, ainsi que le role des concentrations de d’oxygene (O 2 ,) des facteurs HIFs ( hypoxia inducible factors ) et des antioxydants dans leur maintien/auto-renouvellement/expansion ex vivo. Nos resultats montrent que cellules CD34 + /SP proliferent 6 fois plus et generent 2 fois plus de progeniteurs hematopoietiques que les cellules CD34+/non-SP et qu’elles sont 10 a 50 fois plus enrichies en CSH. Leur culture a 20 % d’O 2 (concentration atmospherique) induit leur disparition et nous n’observons leur maintien que pour une concentration abaissee a 1 % d’O 2 . Dans ce contexte, le «  silencing  » de HIF-1 et/ou HIF-2 dans les cellules SP empeche ce maintien en culture. Par ailleurs, la culture en milieu enrichi en antioxydants permet leur expansion jusqu’a 20 fois. Sur le plan metabolique, elles presentent une masse et surtout une activite mitochondriales inferieures aux cellules CD34 + /non-SP. Ces resultats montrent l’interet du modele SP pour cibler les CSH dans le SpH et apportent des elements essentiels quant a leurs caracteristiques, leur besoins et aux mecanismes impliques dans leur regulation.