ANÁLISE GENÉTICA MOLECULAR DE SALMONELAS DE SURTOS DE TIFO AVIÁRIO E PULOROSE NO BRASIL

A Salmonella e uma bacteria da familia Enterobacteriaceae classificada em mais de 2.500 sorotipos que ocorrem normalmente no trato enterico de animais. Muitos destes sorotipos infectam aves e estao associados a gastroenterites (paratifo aviario), mas apenas as biovares Gallinarum e Pullorum do sorotipo Gallinarum podem causar infeccoes sistemicas em aves de producao e resultar em tifo aviario e pulorose, respectivamente. Surtos destas doencas com elevada mortalidade e grandes prejuizos tem ocorrido em granjas avicolas do Brasil nos ultimos anos. O avanco destas infeccoes tem sido controlado com programas de biosseguridade e o uso de uma vacina viva especifica (cepa Gallinarum 9R) nos lotes em producao. Os objetivos deste trabalho foram: (1) realizar a analise do perfil de alguns genes associados as duas biovares do sorotipo Gallinarum em isolados bacterianos de aves de diferentes sorotipos associados ou nao aos recentes surtos, (2) detectar a cepa 9R em isolados de Salmonella de lotes comerciais (vacinados ou nao). As amostras utilizadas incluiram 91 isolados de Salmonella previamente sorotipados e provenientes de aviarios nao vacinados do Brasil entre 2011 e 2014, e 50 isolados de lotes com suspeita de tifo aviario/pulorose e ou que foram submetidos a vacinacao. A metodologia consistiu na extracao de DNA de todos isolados, deteccao generica de Salmonella pela PCR em tempo real (gene invA ) e deteccao de quatro genes ( sefA, fliCg, glgC, speC ) por PCR convencional. Os 50 isolados do segundo grupo foram analisados pelo mesmo procedimento com uma etapa adicional de amplificacao por PCR convencional especifica para deteccao especifica da cepa 9R. Os resultados mostraram que todos isolados foram positivos para o gene invA . Com relacao aos demais genes, ocorreu um perfil especifico para os dez isolados do sorotipo Gallinarum ( sefA + , fliCg + , glgC + , speC +) e os oito de Pullorum ( sefA + , fliCg + , glgC - , speC +). Os demais isolados (previamente identificados como sorotipos Enteritidis, Typhimurium e outros) apresentaram perfil diferente ( sefA +/- , fliCg +/- , glgC - , speC -), possibilitando a diferenciacao das biovares Gallinarum e Pullorum. A analise das 50 amostras de lotes vacinados demonstrou a ocorrencia de 31 isolados do biovar Gallinarum (sendo 20 da cepa 9R) e 19 de outras salmonelas . Em conclusao, o presente estudo demonstra um perfil genetico-molecular especifico para os isolados de sorotipos associados a surtos de tifo aviario e pulorose em aves.