Aislamiento, identificación y caracterización de nuevos probióticos con propiedades funcionales para su uso en alimentación

La relacion entre el hospedador y los microorganismos que colonizan el tracto gastrointestinal (GIT) es importante y fundamental para mantener un buen estado de salud, ya que se ha observado que la baja diversidad microbiana intestinal esta asociada con el riesgo de enfermedades. Debido a esto, se han empleado diferentes tecnicas para identificar y caracterizar bacterias con propiedades probioticas que puedan usarse como ingredientes en alimentos funcionales y de esta manera permitir el restablecimiento de las comunidades microbianas del GIT (aumento de la diversidad) o simplemente para mantener su buen funcionamiento. El principal objetivo de este trabajo ha sido la creacion y caracterizacion de una coleccion de cepas probioticas, pertenecientes a los generos Bifidobacterium y Lactobacillus, propiedad de Laboratorios Ordesa, a partir de muestras biologicas que incluyeron leche materna y heces de madre-bebe lactante. El uso de tecnicas dependientes e independientes de cultivo, incluida la amplificacion y secuenciacion de un fragmento del gen 16S rARN y diferentes test bioquimicos (API 50CH y API ZYM) permitio identificar 288 cepas, donde Bifidobacterium fue el genero predominante, representado por un 93.8% de todos los aislados, comparado con el genero Lactobacillus (6,3%). Ademas de la identificacion de las cepas aisladas, se realizaron analisis in vitro para evaluar diferentes propiedades funcionales, que incluyeron la capacidad de produccion de acidos conjugados a partir de acido linoleico (LA) y acido linolenico (LNA), la actividad antimicrobiana frente a tres patogenos relacionados con la mastitis en la lactancia y la produccion de acido gama-aminobutirico (GABA) a partir del Monoglutamato de Sodio (MGS). De acuerdo a los resultados obtenidos, se encontro que una cepa de Lactobacillus gasseri (ORD0529) fue capaz de inhibir el crecimiento de Staphylococcus aureus CECT4013, microorganismo causante de la mastitis en la lactancia. En cuanto a la produccion de CLA y CLNA, se encontraron 10 cepas buenas productoras de estos acidos grasos conjugados, siendo mayoritariamente bacterias del genero Bifidobacterium y diferentes especies como Bifidobacterium longum subsp. longum (ORD0084), Bifidobacterium pseudocatenulatum (ORD0105), Bifidobacterium breve (ORD0123, ORD0124, ORD0128, ORD 0134, ORD0138 y ORD0294) y Bifidobacterium bifidum (ORD0202); y del genero Lactobacillus solo se obtuvo una cepa perteneciente a Lactobacillus oris (ORD0255). Todas estas cepas fueron patentadas y depositadas en la Coleccion Espanola de Cultivos Tipo (CECT) bajo el numero WO 2014/096352 A2, excepto la ORD0084 y ORD0105. Respecto a la produccion de GABA, solo se detecto la presencia de la enzima GAD en 7 cepas del genero Bifidobacterium, concretamente en especies de Bifidobacterium adolescentis (ORD00106, ORD0119, ORD208, ORD0410, ORD0459 y ORD0465) y Bifidobacterium angulatum (ORD0026), sin embargo solo 6 de ellas fueron capaces de exportar el GABA. Los resultados obtenidos sugieren que estas cepas podrian ser tenidas en cuenta, para emplearse como ingredientes en productos alimentarios y/o complementos.