Enginyeria de quitinases de la família GH18 per a l’obtenció de polímers de quitosà amb seqüències definides

catalaLes quitinases son glicosilhidrolases (GH) que catalitzen la hidrolisi d’enllacos glicosidics β(1→4) de polimers de quitina i quitosa. Les quitinases de la familia GH18 presenten activitat de transglicosidacio i poden catalitzar la formacio de nous enllacos glicosidics entre un sucre donador i un acceptor, i obtenir aixi quitooligomers (COS), que tenen diferents aplicacions biotecnologiques. Amb l’objectiu d’obtenir COS amb estructures definides, s’esta utilitzant les quitinases com a eina sintetica. En el present treball s’ha introduit l’estrategia glicosintasa sobre quitinases GH18. Mitjancant l’enginyeria del centre actiu de les quitinases es preten eliminar/disminuir l’activitat hidrolitica natural i incrementar l’activitat de sintesi.Paraules clau: Quitooligosacarid, enginyeria de proteines, quitinasa, glicosintasa, hidrolisi, transglicosidacio. EnglishChitinases are glycoside hydrolases (GH) that catalyse the hydrolysis of β(1→4) glycosidic bonds of chitin and chitosan polymers. Some chitinases also have transglycosylase activity, allowing them to introduce new glycosidic bonds between donor and acceptor sugar molecules with the consequent generation of chitin-oligosaccharides (COS), which may be useful for a range of biological applications. Chitinases are used as a synthetic tool to obtain well-defined COS. We propose here the application of glycosynthase technology on GH18 chitinases. Protein engineering is used to increase the transglycosylation activity while concomitantly decreasing the hydrolysis activity.Keywords: Chito-oligosaccharide, protein engineering, chitinase, glycosynthase, hydrolysis, transglycosylation.