Reversal of multi-drug resistance in ovarian cancer cell by RNA interference

目的 探讨应用RNA干扰(RNAi)技术逆转卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞多药耐药的可行性.方法将设计合成的针对多药耐药基因MDR1的特异性小分子干扰RNA(siRNA),用脂质体转染具有MDR1基因高表达的卵巢癌紫杉醇耐药细胞株OVCAR8/TR.用荧光定量RT-PCR技术和流式细胞仪分别测定转染前后细胞MDR1 mRNA及糖蛋白P-gp表达的变化;三磷酸腺苷(ATP)生物荧光法检测转染前后细胞对顺铂、氟尿嘧啶、阿霉素和紫杉醇药物敏感性(以ATP抑制率判断)的变化情况.结果转染后24、48、72、96和120 h,OVCAR8/TR细胞MDR1 mRNA的抑制率分别为26.42％、84.00％、78.43％、45.85％和0;转染后48 h MDR1 mRNA的抑制率达到最高峰.转染后24、48、72、96和120 h,OVCAR8/TR细胞P-gp的抑制率分别为16.71％、49.64％、85.23％、65.98％和9.44％;转染后72 h P-gp的抑制率达到最高.转染MDR1 siRNA后,能够明显提高OVCAR8/TR细胞对紫杉醇和阿霉素的敏感性,在紫杉醇的作用下,转染前后OVCAR8/TR细胞的ATP抑制率分别为(25.8±3.1)％和(78.0±9.8)％,转染前后比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论在OVCAR8/TR细胞中,针对MDR1合成的siRNA能够有效地抑制MDR1 mRNA和P-gp的表达,并能恢复其对紫杉醇和阿霉素的敏感性.应用RNAi技术,能够逆转卵巢癌细胞对化疗药物的多药耐药。