糖尿病环境下成骨细胞 KDM 6 B 表达的变化

2019 
目的 研究糖尿病环境下骨髓间充质干细胞(BMSCs)的成骨分化能力及组蛋白去甲基化酶KDM6B表达的变化情况。 方法 制备糖尿病大鼠模型,分离培养糖尿病模型大鼠及正常大鼠来源的BMSCs,BMSCs以高糖、晚期糖基化终末产物(advanced glycosylation products,AGE)模拟糖尿病环境,即将BMSCs分为6组:糖尿病组(糖尿病大鼠来源)和正常组(正常对照大鼠来源),高糖组(含D-葡萄糖30 mmol/L)和正常组(含普通浓度的D-葡萄糖5.5 mmol/L作为高糖对照),AGE组(含AGE 300 μg/mL)和牛血清白蛋白(BSA,作为AGE对照)组(含BSA 300 μg/mL)。除糖尿病组BMSCs为糖尿病大鼠来源,其余BMSCs为正常对照大鼠来源。各组BMSCs分别成骨诱导7 d后,进行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色,观察BMSCs的诱导骨向分化能力;以实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组BMSCs的成骨相关基因Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、组蛋白去甲基化酶KDM6B mRNA的表达,以Western blot检测H3K27Me3蛋白的表达。 结果 糖尿病组、高糖组及AGE组BMSCs的ALP染色细胞数均少于其相应对照组(P 结论 糖尿病环境下BMSCs成骨分化能力减弱,且Runx2 mRNA表达受到抑制,可能与KDM6B的表达抑制后H3K27Me3表达增加有关。
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