Charakterisierung von Enon-Oxidoreduktasen und 3-Dehydroquinat-Synthasen

Der letzte Schritt der Biosynthese von 4-Hydroxy-2,5-dimethyl-3(2H)-furanon (HDMF), dem wichtigsten Aromastoff der Erdbeere, wird in der Erdbeere durch Fragaria x ananassa Enon-Oxidoreduktase (FaEO) und in der Tomate durch Solanum lycopersicum Enon-Oxidoreduktase (SlEO) katalysiert. Nach heterologer Expression der SlEO wurden kinetische Daten aufgenommen und mit den bereits bekannten Daten der FaEO verglichen. Durch 2-D-Gelelektrophorese mit anschliesender massenspektrometrischer Analyse wurden Veranderungen des Proteoms von stabil transgenen Erdbeerpflanzen, in denen das fur FaEO codierende Gen dauerhaft stillgelegt ist, im Vergleich zu Kontrollfruchten charakterisiert. Um zu klaren, ob es sich bei einem weiteren Schritt der HDMF-Biosynthese um eine durch 3-Dehydroquinat-Synthase (DHQS) katalysierte Nebenreaktion handelt, wurden Genexpressionsanalysen durchgefuhrt und eine DHQS aus Fragaria x ananassa kloniert und heterolog exprimiert.