Procede pour detecter des acides nucleiques au moyen de ligature a mediation par cibles d'amorces bipartites

L'invention concerne des compositions et un procede de detection de molecules uniques d'acides nucleiques par la replication selon le modele du cercle roulant (RCA) de matrices circulaires a brin unique, appelees cercles cibles d'amplification, amorcees par des amorces immobilisees. Dans un mode de realisation du procede, appele replication selon le modele du cercle roulant a amorce bipartite (BP-RCA), la RCA du cercle cible d'amplification (ATC) depend de la formation d'une amorce par la ligature a mediation par cibles. En presence d'une molecule d'acide nucleique comportant la sequence cible, une sonde et une combinaison sonde/oligonucleotide amorce peuvent s'hybrider a des sites adjacents sur la sequence cible, ce qui permet aux sondes d'etre liees ensemble. En fixant la premiere sonde a un substrat tel qu'une perle ou une lamelle de verre, on peut enlever apres la ligature la sonde/amorce non liee. Les seules amorces restantes sont les amorces liees a la premiere sonde par la partie sonde de la sonde/amorce. L'amorce liee peut ensuite etre utilisee pour la replication primaire de son ATC apparente. De cette maniere, un ATC sera replique uniquement en cas de presence de la sequence cible (a laquelle est complementaire sa sonde/amorce apparentee). Le procede BP-RCA peut servir, par exemple, a determiner les sequences cibles presentes dans un echantillon d'acide nucleique ou pour determiner les echantillons contenus dans une sequence cible.