猪瘟病毒和牛病毒性腹泻病毒双重 RT-PCR鉴别检测方法的建立及应用

猪瘟病毒和牛病毒性腹泻病毒同属于黄病毒科瘟病毒属，在基因组序列上有很高的同源性，2种病毒交叉污染的情况十分严重，给疫病诊断和疫苗质量控制带来很大麻烦。为了更好的对这2种病的病原进行分子生物学鉴别检测，参考GenBank上2种病毒标准株的基因组序列，选取各自的保守基因区域设计可以进行鉴别检测的特异性引物，经过对PCR反应条件的优化，建立了可以对2种病毒同时检测的双重RT—PCR方法。该方法对猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪日本脑炎病毒、猪伪狂犬病病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪圆环病毒2型的扩增结果均为阴性；该检测方法的敏感性为5ng病毒基因组RNA。建立的猪瘟病毒和牛病毒性腹泻病毒双重RT—PCR检测方法特异性强、敏感性高，可以用于2种疫病的临床分子检测，也可用于猪瘟疫苗的质量控制，为2种病毒的交叉污染的检测提供一种方便、快捷的方法。