Nouveau test ultrarapide pour la détection de bactéries

2011 
Resume Introduction Les controles bacteriologiques sont destines a reduire les risques de transmission d’infections. Toutefois, les cultures necessitent de 18 heures a 14 jours et peuvent etre faussement negatifs pour des bacteries a croissance lente ou deficientes. L’objectif de ce travail a ete de valider un outil pour ameliorer les performances des tests bacteriologiques. Methodes Ce test est base sur la reaction de polymerisation en chaine rapide ou fast real-time PCR (frt PCR). Les ADN extraits des echantillons contenant un controle interne sont introduits dans quatre tubes contenant les amorces et sondes. Le programme du thermocycleur est fixe a 1 × a 95 °C, dix minutes et 45 × (15 secondes a 95 °C, huit secondes a 52 °C) et dix secondes a 72 °C. Resultats La frt PCR detecte 0,01 UFC/μl (equivalent d’unite formatrice de colonies) de toutes les bacteries et identifie huit genres sans interferences potentielles de l’ADN bacterien de l’environnement ni des champignons et sans procedures additionnelles. Discussion La frt PCR detecte toutes les bacteries et quantifie la charge des staphylocoques, streptocoques, corynebacteries, Enterobacteries , Haemophilus, Acinetobacter, Pseudomonas et Propionibacteriaceae . Conclusion Les cultures ne peuvent etre obtenus qu’apres 24 heures ou plus d’incubation alors que frt PCR reduit ce temps a 90 minutes. Des series plus importantes doivent etre testees pour confirmer l’utilite de ce nouveau test.
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