Increased confidence in the identification of alleles with molecular count

Un metodo de estimacion del numero de moleculas de polinucleotidos de partida secuenciadas a partir de multiples muestras, comprendiendo el metodo: unir un adaptador a las moleculas de polinucleotidos de partida de multiples muestras diferentes, en donde el adaptador para cada muestra comprende: una marca de un unico identificador multiplex (MID) especifico para la muestra, haciendo posible la marca del identificador multiplex la identificacion de la muestra a partir de la cual se deriva un polinucleotido; y una region de bases degeneradas (DBR) que comprende al menos una base de nucleotidos seleccionada de: R, Y, S, W, K, M, B, D, H, V, N, y las versiones modificadas de las mismas, siendo la degeneracion de las DBR de tal modo que es probable que cada polinucleotido individual tenga una DBR diferente; reunir las multiples muestras unidas a adaptadores diferentes para generar una muestra conjunta; amplificar los polinucleotidos unidos al adaptador en la muestra conjunta; secuenciar una pluralidad de los polinucleotidos amplificados unidos al adaptador, en donde se obtiene la secuencia del MID, de la DBR y de al menos una porcion del polinucleotido, para cada uno de la pluralidad de polinucleotidos unidos al adaptador; y determinar el numero de secuencias de DBR definidas presentes en la pluralidad de polinucleotidos secuenciados unidos al adaptador a partir de cada muestra, para determinar el numero de polinucleotidos de partida de cada muestra que fueron secuenciados en la etapa de secuenciacion