Viabilidad de las células y liberación de prostaciclina en células endoteliales cultivadas de vena umbilical humana

La construccion de sustitutos eficientes de los vasos sanguineos humanos depende en gran manera del uso de celulas endoteliales cultivadas (CE) viables y por completo funcionales. Sin embargo, hasta la fecha, se han publicado muy pocos estudios centrados en la evaluacion de la viabilidad celular de las CE cultivadas. En la presente investigacion, hemos determinado la viabilidad celular, la actividad del factor de von Willebrand y de la prostaciclina (PGI 2 ) en cultivos de celulas primarias de CE de la vena umbilical humana, para identificar el pase celular especifico que es mas apropiado para el desarrollo de organos artificiales mediante ingenieria de tejidos. La viabilidad celular se determino mediante la cuantificacion de la concentracion intracelular de varios iones con microanalisis de rayos X por sonda de electrones de alta sensibilidad, mientras que el factor von Willebrand se analizo mediante inmunohistoquimica y la liberacion de PGI 2 se cuantifico mediante radioinmunoanalisis. Los resultados de los analisis de la presente investigacion demuestran que el cociente K/Na fue diferente para cada pase de celulas (4,72 para el primero, 4,55 para el segundo y 7,82 para el tercero), lo que sugiere que la mayor viabilidad celular corresponde al tercer pase. En comparacion, la produccion de PGI 2 fue mayor en los dos primeros pases de celulas, con una disminucion significativa en el tercero (6,46 ± 0,10, 5,98 ± 0,08, y 1,62 ± 0,05 ng/ml de sobrenadante para el primer, segundo y tercer pase, respectivamente), mientras que la expresion del factor von Willebrand fue similar en los tres pases de celulas analizados en la investigacion (64,12%, 66,66%, y 65,93% de celulas positivas, respectivamente). Estos datos sugieren que las celulas correspondientes al segundo pase muestran el mejor cociente de viabilidad: funcionalidad y, por esta razon, deben usarse para los protocolos de ingenieria de tejidos.