EFEITO DOS INIBIDORES DE PROTEASES VIRAIS EM BIOFILMES DE TRICHOSPORON SPP

Trichosporon spp. e o agente causador da tricosporonose, doenca fungica que acomete principalmente pacientes imunodeprimidos por doencas hematologicas. Estudos mostraram que e possivel inibir proteases asparticas, importantes para biofilmes fungicos. A partir disso, investigou-se o efeito dos inibidores de proteases virais sobre os biofilmes de Trichosporon spp. Foram utilizadas 18 cepas, que foram expostas aos antivirais ritonavir - RIT, fosamprenavir - FSV, darunavir - DAR, atazanavir - ATZ e liponavir-ritonavir - LPV-RIT. Analisou-se as alteracoes na biomassa induzidas pelos inibidores de proteases com metodos de cristal violeta (CV) e XTT. Para a formacao dos biofilmes os inoculos foram coincubados com os antivirais (100μg/mL), a 35 oC por 6 horas, com RPMI, a 80 rpm. Apos a adesao, os sobrenadantes foram coletados, e os pocos lavados com PBS e preenchidos com RPMI e antirretrovirais. A influencia destes foi observada nos tempos de 6h, 24h, 48h e 72h. Para T. coremiiforme, RIT e LPV-RIT diminuiram a viabilidade e a biomassa. No caso de T. inkin¸ nenhum dos antivirais testados interferiu no metabolismo fungico e RIT, FSV e LPV-RIT reduziram a massa celular dos biofilmes. Para T. mucoides, nenhum antiviral teve efeito sobre a atividade metabolica ou a biomassa do fungo em biofilmes. Nos testes com T. japonicum, nenhum dos antivirais agiu sobre a atividade metabolica, mas RIT, DAR, FSV e LPV-RIT reduziram a massa celular. O metabolismo de T. debeurmannianum foi estimulado por DAR e reduzido por RIT, FSV e LPV-RIT, e a biomassa foi diminuida por todos os antivirais. Com T. ovoides, RIT e LPV-RIT atuaram diminuindo o metabolismo e, quanto a massa celular, RIT, FSV e LPV-RIT reduziram-na. Para T. faecale, a biomassa foi diminuida por todos os antivirais, a excecao de ATZ, e a viabilidade manteve-se inalterada frente a todos eles. Com T. asahii, todos os antivirais, exceto DAR, reduziram a viabilidade metabolica. Porem, apenas RIT atuou sobre a biomassa, diminuindo-a.