The co-inhibitory effect of bcl-2 antisense oligonucleotides and As2O3 on bladder cancer cell line

目的 观察bcl-2反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides,ASODN)与三氧化二砷(As2O3)对膀胱癌细胞生长的抑制作用,比较联合或单独用药的抑制效果.方法 人工合成包含bcl-2翻译起始位点的ASODN及无义核酸(NSODN),以质脂体(Lipofectamine)作为载体转染T-24膀胱癌细胞株.分为对照组(加PBS)、反义组(ASODN 1 μmol/L)、无义组(NSODN 1 μmol/L)、As2O3组(2 μmol/L)、As2O3+反义组(联合用药组:As2O3 1 μmol/L,ASODN 0.5 μmol/L).采用肿瘤细胞生长曲线、四氮唑蓝(MTT)实验和集落形成实验,观察药物对肿瘤细胞生长的抑制作用,流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡情况.结果 从细胞生长曲线看出,与对照组相比,联合用药组肿瘤细胞数减少了62.09%,反义组减少了31.04%,As2O3组减少了39.08%,无义组减少了21.84%.MTT实验,肿瘤细胞抑制率联合用药组为(86.11±7.35)%,As2O3组为(67.21±8.99)%,反义组为(50.23±5.46)%,无义组为(8.22±0.33)%,组间比较差异有统计学意义(F=180.2,P＜0.01).半数抑制浓度(IC50)联合用药组为(0.98±0.12)μmol/L,As2O3组为(1.53±0.32)μmol/L,反义组的为(1.96±0.22)μmol/L,无义组为(4.33±0.33)μmol/L,组间比较差异有统计学意义(F=354.0,P＜0.01).肿瘤细胞集落生存率联合用药组为53.76%,反义组为76.32%,As2O3组为75.25%,无义组为90.33%.肿瘤细胞凋亡率联合用药组为(22.66±1.66)%,组间比较均差异有统计学意义(F=232.15,P＜0.01).结论 Bcl-2反义寡核苷酸与As2O3联合应用可明显提高对膀胱癌细胞生长的抑制作用。