305 - Colorants azoïques de l’endothélium cornéen dans le but d’améliorer le contrôle qualité des greffons conservés. Expérimentation animale.

Introduction Dans le but d’ameliorer le controle endothelial par analyse d’image des greffons conserves, nous avions selectionne (SFO2008 025), parmi 30 colorants, deux colorants mono ou di-azoiques (Bleu Evans et Chicago Sky Blue) capables de colorer les bordures des cellules endotheliales qui deviennent ainsi visibles en fluorescence. Dans cette seconde etape, nous avons evalue la toxicite de ces 2 colorants sur 2 modeles animaux Materiels et Methodes Nous avons realise des autogreffes transfixiantes de cornee chez le rat (3 mm, 11 greffes) et le lapin (7 mm, 5 greffes). Apres trepanation, l’endothelium etait expose 1 minute au colorant puis rince au BSS avant d’etre observe sterilement sous microscope a fluorescence (filtre CY3). Temoins negatifs : autogreffes sans coloration et autogreffes apres destruction mecanique de l’endothelium. Le greffon etait ensuite resuture par un surjet de monofilament. Une semaine apres greffe l’animal etait sacrifie et enuclee. La transparence du greffon etait notee. L’endothelium etait colore au rouge Alizarine et monte a plat avant d’etre examine sous microscope optique. Le reste de l’œil etait observe en histologie conventionnelle. Resultats Les colorants coloraient bien l’endothelium des animaux. Le modele rat s’est avere peu adapte pour cette etude endotheliale puisque les temoins non colores presentaient des lesions endotheliales non specifiques. Le modele lapin etait par contre bien adapte. Les greffons etaient transparents. Les deux colorants paraissaient bien toleres. Il n’existait pas difference morphologique entre les temoins non colores et les endotheliums colores. Les temoins avec destruction endotheliale ne montraient pas de cicatrisation endotheliale. L’histologie ne revelait pas de signe de toxicite pour les autres tissus oculaires. Discussion Nos travaux suggerent que ces deux colorants azoiques n’ont pas de toxicite endotheliale chez le lapin. Conclusion L’evaluation des proprietes tinctoriales et de la toxicite de ces colorants sur des cornees humaines scientifiques ex vivo est en cours, avant d’envisager une evaluation a plus large echelle en banque de cornee.