尿道致病性大肠杆菌U17株 rstA 缺失株降低对小鼠的致病性

目的探究双组份系统RstA/RstB中效应基因 rstA 对尿道致病性大肠杆菌毒力的影响。 方法利用λ Red重组系统构建UPEC U17 rstA 缺失株U17Δ rstA ，并构建相应的回复株，通过体内外试验评价 rstA 基因缺失对UPEC毒力的影响。 结果生长曲线的测定结果显示，在LB普通培养基中，缺失株生长速度与野生株相似，但在LB贫铁培养基中，缺失株生长速度较野生株相比明显下降；体外环境应激试验结果显示，缺失株在强酸、强碱、高渗透压、尿素、氧化应激等环境压力下的生存能力与野生株相似；菌株生物被膜检测结果显示，缺失株的生物被膜形成能力与野生株相当；荧光定量PCR检测结果显示， rstA 基因在贫铁环境下的表达水平较正常条件下显著上调，暗示贫铁环境可能是 rstA 发挥效应的刺激信号。6周龄BALB/c小鼠尿道感染试验结果显示， rstA 缺失株在尿液、膀胱、肾脏中的带菌量显著低于野生株，而回复株毒力恢复至野生株水平，表明 rstA 缺失能显著降低UPEC U17的毒力。 结论 rstA 与尿道致病性大肠杆菌的致病性相关，为潜在的毒力因子。