Imunocitoquímica e imunohistoquímica para o diagnóstico laboratorial da leishmaniose tegumentar

0 aumento significativo do numero de casos notificados da Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) e a expansao geografica da endemia tem motivado o desenvolvimento de novas tecnologias para auxiliar no diagnostico das leishmanioses, visando minimizar as restricoes apresentadas pelos testes diagnosticos disponiveis nos servicos de saude. 0 presente trabalho empregou imunocitoquimica e imunohistoquimica (ICQ/IHQ) como metodos diagnosticos laboratoriais para LTA. Amostras de culturas de Leishmania in vitro e cortes histologicos de lesoes em animais infectados experimentalmente foram submetidos a ICQ/IHQ, utilizando anticorpos policlonais desenvolvidos para este estudo e o complexo avidina-biotina modificado (Ultra Streptavidin®). Em comparacao com outras tecnicas empregadas para o diagnostico da LTA, nos casos avaliados, a IHQ apresentou resultados semelhantes aos da histopatologia com coloracao HE, com sensibilidade de 33,3% para formas amastigotas. Quando considerada a presenva de antigenos de Leishmania no padrao celular, a IHQ apresentou uma sensibilidade de 83,3%, significativamente maior que na histopatologia e compativel com metodos padrao ouro de cultura e PCR. As metodologias de ICQ/IHQ desenvolvidas neste trabalho foram capazes de demonstrar em biopsias de lesoes, a presenca de formas amastigotas e antigenos de Leishmania, oferecendo contribuicao adicional ao diagnostico da LTA, sendo de facil aplicacao e podendo ser utilizada no sistema publico de saude. The significant increase in cutaneous leishmaniasis (CL) notified cases and the geographic expansion of this endemy has motivated the development of new techniques to help in leishmaniasis diagnosis, seeking the minimization of the restrictions imposed by the diagnostic tests available at the health services. The current study applied immunocytochemistry and immunohystochemistry methods (ICC/IHC) for laboratory diagnosis of CL. Imprints and histological sections from tissue infected with Leishmania were submitted to ICC/IHC methods using polyclonal antibodies developed for this study and a modified avidin-biotin complex (Ultra Streptavidin®). The samples also were submitted for routinely stained hematoxylin and eosin (H&E) specimens and gold standard methods (culture and PCR). Compared with other useful techniques for the CL diagnosis, ICC/IHC showed the same sensitivity results (33%) as H&E stain for amastigotes recognition. When the presence of Leishmania antigens was evaluated, ICC/IHC presented 83,3% sensitivity, i.e., higher than that detected by histopathology and equivalent with gold standard methods (culture and PCR). The ICC/IHC techniques developed in the current study were able to recognize amastigote forms and also Leishmania antigens in lesion biopsies, offering an additional help to CL diagnosis and it can be easily applied in the public health system.