Influence of CaMKIIδ ＲNA interference on expression of its downstream molecules

目的研究钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱδ(Ca 2+ /Calmodulin dependent kinase Ⅱδ，CaMKⅡδ) RNA干扰对下游基因表达及破骨细胞分化的影响，以证实其在破骨细胞分化中的作用。 方法应用慢病毒构建CaMKⅡδ RNA干扰载体，并确定最佳感染复数(multiplicity of infection，MOI)值及转染效率。小鼠RAW264.7细胞分为对照组、空白载体组和干扰组。转染5 d后收获细胞，确定干扰效率；并检测RNA干扰对活化T细胞核因子蛋白c1(NFATc1)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、非受体酪氨酸激酶(c-Src)基因表达及破骨细胞分化的影响。 结果成功构建了CaMKⅡδ RNA干扰载体，最佳转染MOI值为30，转染效率可达78%( P P P P P P < 0.01)。 结论CaMKⅡδ RNA干扰可显著下调其下游NFATc1、TRAP、c-Src基因表达并抑制破骨细胞分化；CaMKⅡδ在破骨细胞分化中可能发挥关键调控作用。