Kardiyomiyoblast Hücre Regülasyonunda Taube Nuss Geninin Fonksiyonel Analizi

Gelisim evrelerinin veya dokuya ozgu fizyolojik sureclerin duzenlenmesinde ve yurutulmesinde farklilasmis gen ekspresyonu buyuk onem tasimaktadir. “Subtractive” hibridizasyon yontemi dokuya ozgu ekspresyonu olan genlerin tespit edilmesi icin oldukca etkin bir yontemdir. Daha onceki calismalarda laboratuvarimizda BALB/c irki farelerde kalbe ozgu ekspresyonu olan genleri iceren “Subtractive” hibridizasyon cDNA kutuphanesi olusturulmustur. Onemli bir transkripsiyon faktoru olan Taube Nuss (Tbn), bu kutuphaneden elde edilen genlerden birisidir. Bu calismadaki amacimiz, Tbn geni ile iliskili oldugu dusunulen diger genlerin ekspresyonlarinin arastirilmasi ve Tbn yolaginin belirlenmesidir. Calisma kapsaminda BALB/c irki farelerden elde edilen kalp ve iskelet kasi dokularina ozgu Tbn geninin ekspresyonu Northern Blot analizi ile arastirilmistir. Ardindan, Tbn genine ozgu siRNA’lar kullanilarak H9c2 rat kardiyomiyoblast hucre soyunda Tbn geni sessizlestirilmistir. Yolak analizleri sonucunda Tbn ile iliskili olabilecegi tespit edilen Pparg, Cebpa, Taf10 ve Myocd genlerinin sessizlestirilen hucrelerdeki ekspresyon degisimleri arastirilmistir. Bu hucrelerde, Myocd gen ekspresyonunun azaldigi ve Pparg gen ekspresyonunun arttigi saptanmistir. Bu sonuclar, Tbn geninin kalp dokusunda duzenleyici bir rol oynadigini isaret etmektedir.