三角帆蚌 cyclin B 基因克隆及功能

通过现代分子生物学技术，从三角帆蚌（Hyriopsis cumingii）中克隆了细胞周期蛋白B（cyclin B）基因的cDNA，得到长度为1 024 bp的序列信息，包括768 bp的ORF，197 bp的3'-UTR，编码255个Aa。进一步分析表明，三角帆蚌cyclin B基因与牡蛎、扇贝具有较高的相似性，其氨基酸序列中具有1个典型的周期蛋白框（cyclin-box），并存在2个周期蛋白依赖性蛋白激酶（CDK）的作用位点。通过RT-qPCR研究显示：三角帆蚌cyclin B基因在性腺中的表达最高，在雌性中的表达量显著高于雄性（P 0.05）；沉默cyclin B基因后，除外套膜外，其在性腺和鳃的表达显著降低（P < 0.05），表明RNA干扰（RNAi）对三角帆蚌不同组织具有不同的沉默效果。流式细胞仪测定RNAi后细胞的分裂时相变化，发现性腺和鳃细胞中G2/M期占比下降，表明cyclin B基因在三角帆蚌中能调控细胞分裂。初步研究了三角帆蚌cyclin B基因及其功能，为三角帆蚌细胞体外建系奠定分子基础。