Crioprotetores e embriotoxicidade em Zebrafish (Danio rerio)

A criopreservacao e uma tecnica que resulta na inercia do desenvolvimento embrionario e consiste na desidratacao do embriao, seguido de resfriamento com crioprotetores, a fim de manter intacto o material genetico da celula desejada. A criopreservacao em peixes ainda nao e uma tecnica viavel, por varios motivos, entre eles podem ser citados: tamanho do embriao e a citotoxicidade dos crioprotetores. Todos os testes realizados para toxicidade crioprotetora estao relacionados a manutencao dos embrioes em diferentes concentracoes a temperatura ambiente. No entanto, nao ha dados comparando esta toxicidade entre os embrioes mantidos a temperatura ambiente. Assim, o objetivo do presente trabalho foi analisar a toxicidade de crioprotetores em temperatura ambiente e resfriados. Os testes foram realizados em embrioes de peixe-zebra (Danio rerio) usando 12 concentracoes dos compostos, em diluicao seriada, de 50% a 0,002%. Observacoes de mortalidade e alteracoes teratogenicas foram feitas a cada 24 horas. O DMSO e o glicerol sao os menos toxicos, mas determinam a formacao de edema de pericardio, quando usados em concentracoes maiores que 3,12%. A temperatura de resfriamento, observamos que a toxicidade dos crioprotetores diminuiu e que houve um aumento no atraso na eclosao, o que era esperado, ja que em baixas temperaturas o tempo de desenvolvimento do embriao foi reduzido. Os crioprotetores mais indicados para o resfriamento foram o metanol e o etilenoglicol, em concentracoes de 1,56% a 0,78%.