司坦唑醇激活大鼠生长板软骨细胞雌激素受体α、胰岛素样生长因子1受体和细胞外信号调节激酶1／2的交联对话

目的探讨司坦唑醇（ST）对离体培养的促性腺激素释放激素拟似物（GnRHa）处理后青春期大鼠生长板软骨细胞的作用及其分子层面机制。方法设计并处理后获得胫骨原代软骨细胞，采用免疫组织化学法，检测ST处理后软骨细胞核增殖细胞核抗原（PCNA）的表达；采用Western Blot法，分析ST作用后软骨细胞雌激素受体α（ERa）、雄激素受体（AR）、胰岛素样生长因子1受体（IGF-1R）及细胞外信号调节激酶（ERK1／2）表达的改变。结果（1）ST处理后，PCNA呈阳性的细胞明显增加，与0d组（0．05％）比较，1d、2d、3d组的阳性率差值显著增加（分别为11．0％，24．0％，14．0％）。（2）延长ST作用时间和增加ST浓度，AR均未能被激活。ST作用后磷酸化（P）．ERa、P—IGF-1R、P-ERK1／2表达上调，并存在时间和浓度依赖；ERa或丝裂原激活蛋白激酶激酶（MAPK）被阻断后，ST所致的P—ERa表达较未阻断时减弱（1．18±0．07、2．35±0．05；1．45±0．17、2．77±0．39，P均〈0．05）；ERa或IGF-1R阻断后的p-IGF-1R较ST组显著减弱（4．42±0．42、8．00±0．30；0．77±0．17、11．37±0．97，P均〈0．05）；MAPKK或IGF．1R被阻断后p-ERK1／2较未阻断组显著减弱（0．61±0．14、9．26±0．92；4．27±0．76、8．59±0．52，P均〈0．05）。结论ST可以促进软骨细胞增殖，其作用主要经ERa介导，包括了经典的与ERa以配体结合方式和以非配体激活的MAPK途径，并同时激活IGF-1R，实现其促长骨生长板软骨细胞生长和成熟的生物效应。