淡色库蚊表皮蛋白 CpCPR117 基因克隆及表达分析

目的克隆淡色库蚊表皮蛋白CpCPR117基因，分析其不同发育阶段的表达模式，为探索其抗药性功能奠定基础。 方法利用同源克隆从淡色库蚊Ⅲ龄末Ⅳ龄初幼虫中克隆CpCPR117基因编码区序列，并用邻接法与其他昆虫同源序列构建系统发育树。利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测该基因在淡色库蚊敏感和氯氰菊酯抗性品系不同发育阶段(Ⅰ和Ⅱ龄幼虫、Ⅲ和Ⅳ龄幼虫、蛹、羽化3 d成蚊)的表达情况。表达差异分析采用独立样本t检验。 结果克隆获得表皮蛋白CpCPR117基因，该基因全长459 bp，编码152个氨基酸，含有表皮蛋白CPR家族的RR-2基序。序列同源性比对和系统发育树分析显示，淡色库蚊与致倦库蚊同源蛋白亲缘关系最近，其氨基酸序列一致性为98.00%。RT-qPCR结果显示，CpCPR117在淡色库蚊敏感和抗性品系各龄期均有表达，并且在Ⅰ和Ⅱ龄幼虫、蛹期表达量的差异均有统计学意义(Ⅰ和Ⅱ龄幼虫：t=-17.177，P 结论CpCPR117基因在淡色库蚊敏感和抗性品系不同发育阶段的表达水平存在差异，为进一步探索其在淡色库蚊氯氰菊酯抗药性的功能机制奠定了基础。