Viabilité et état de différenciation des hépatocytes humains immunoprotégés par macroencapsulation et transplantés chez le rat.

Objectif - Determiner le delai de survie et l'etat de differenciation des hepatocytes humains immunoproteges par macroencapsulation et transplantes chez le rat sans immunosuppression. Methodes - Des hepatocytes humains ont ete isoles, encapsules dans des fibres creuses et transplantes dans la cavite peritoneale de rats immunocompetents. Aux temps J3, J7 et J14 suivant la transplantation, les fibres ont ete explantees. Les caracteres morphologiques en microscopie optique et electronique et l'expression des genes ont ete compares a ceux des hepatocytes encapsules non transplantes (J0). Les ARNm des cytochromes P450 3A et de l'albumine humaine ont ete quantifies par Northern blot. Les proteines cytochromes P450 3A ont ete detectees par Western blot et leur activite enzymatique mesuree par dosage du metabolite 6β-hydroxyle de la testosterone en chromatographie liquide haute performance. Resultats - Les hepatocytes conservaient une viabilite superieure a 60 % et des criteres morphologiques de differenciation jusqu'a J7. Les transcrits de l'albumine et des cytochromes P450 3A etaient detectables jusqu'a J14. A J3 et a J7, les transcrits de l'albumine etaient de l'ordre de 30 % par rapport a JO tandis que ceux du cytochrome P450 3A4 et du cytochrome P450 3A5 etaient respectivement de 0 et de 65 %. Les proteines cytochromes P450 3A etaient detectees par Western blot jusqu'a J14 et leur activite 6β-hydroxylase etait de 17 % des J3 par rapport a J0, en accord avec une disparition des ARNm du cytochrome P450 3A4. Conclusions - Il est possible de maintenir en survie a court terme des hepatocytes humains encapsules et transplantes chez le rat. D'autres conditions experimentales visant a prevenir ou a ralentir la diminution d'expression des genes de differenciation hepatocytaire sont a explorer.