Quaternary ammonium cytotoxicity in a human conjunctival cell line

Cytotoxicite des ammoniums quaternaires sur une lignee de cellules conjonctivales humaines Buts de l'etude : Certains collyres peuvent etre toxiques pour la surface oculaire, en particulier en raison des conservateurs presents dans leurs formulations. L'objet de ce travai est d'etudier in vitro la cytotoxicite des orincipaux ammoniums quaternaires. Materiel et methodes : Des tests de cytotoxicite ont ete effectues sur une lignee de cellules conjonctivales humaines par microtitration cytofluorimetrique en lumiere froide. L'integrite membranaire (test au rouge neutre), la condensation de la chromatine (test au Hoechst 33342), et es especes reactives de l'oxygene (tests a la dichlorofluoresceine diacetate et a l'hydroethidine) ont ete evaluees apres un traitement de 15 minutes ou de 15 minutes suivies de 24 heures de recuperation cellulaire par differentes concentrations d'ammoniums quaternaires (0,00001 a 0,01 %). Les molecules testees ont ete e chlorure de benzalkonium, le bromure de benzododecinium et le cetrimide. Resultats : Les differents conservateurs testes ont montre une activite similaire in vitro. Ils entrainaient une chute precoce de l'integrite membranaire (1 minutes) aux concentrations de 0,005 et 0,01 % (p < 0,001 pour ces deux concentrations), celle-ci etant associee a une augmentation de la condensation de la chromatine pour ces memes concentrations ce qui suggerait un phenomene d'apoptose. Une synthese radicalaire avec oroduction de peroxyde d'hydrogene et d'anion superoxyde a ega ement ete observee des 0,00001 % Conclusion: Les cellules traitees par de fortes concentrations d'ammoniums quaternaires meurent par necrose tandis que les concentrations moins importantes induisent l'apoptose Cette toxicite observee in vitro peut expliquer en partie les alterations de la surface oculaire apres administration au long cours de collyres.