Análisis ecológico y genético de interacciones planta-animal en ambientes mediterráneos

espanolLos mutualismos estan extendidos en los ecosistemas naturales y juegan un papel clave en el mantenimiento de la biodiversidad y los servicios ecosistemicos. Interacciones planta-animal, como la dispersion de semillas y la polinizacion, son fundamentales en la biologia reproductiva de muchas plantas que dependen de animales para la polinizacion de sus flores, la dispersion de sus semillas, o ambas. Estudiar las interacciones planta-animal mediante tecnicas ecologicas clasicas (p. ej. estudios observacionales) puede ser muy complicado. Estos metodos pueden arrojar resultados sesgados (p. ej. diferentes detectabilidades de especies) y no son adecuados para el estudio de algunos procesos por cuestiones de escala (p. ej. dispersion a larga distancia). La aplicacion de tecnicas indirectas como las herramientas geneticas puede ayudar en el estudio de estos procesos. En este sentido, el desarrollo de herramientas moleculares como los marcadores microsatelites y su aplicacion en estudios de ecologia hacen posible incrementar nuestro conocimiento sobre las interacciones planta-animal y sus procesos asociados. Esta tesis esta compuesta de cuatro capitulos en los que se estudian mutualismos planta-animal desde diferentes enfoques (combinando herramientas ecologicas y geneticas) y escalas geograficas. En el primer capitulo aplicamos microsatelites para analizar los patrones de estructura genetica de un arbusto de fruto carnoso (Pistacia lentiscus) en todo su rango de distribucion (Cuenca Mediterranea), y el papel de los eventos de dispersion de semillas a larga distancia en estas tendencias geneticas. Encontramos que los movimientos de las aves frugivoras migratorias concuerdan con la estructura genetica espacial de la especie estudiada. Por tanto, las perturbaciones antropicas o el cambio climatico que podrian interrumpir las rutas migratorias de las aves, podrian tener tambien consecuencias negativas para las plantas. En el segundo capitulo estudiamos los efectos de la fragmentacion extrema en la diversidad genetica de poblaciones remanentes de P. lentiscus. Realizamos analisis de microsatelites, y anillamientos y censos de aves para abordar nuestras hipotesis. Los resultados revelaron una alta diversidad genetica y la falta de diferenciacion genetica en los parches de P. lentiscus estudiados, probablemente como resultado de una intensa pero reciente fragmentacion, pese a una contribucion escasa de las aves a la dispersion de semillas de la especie. Sin embargo, podria haber impactos latentes ya que observamos senales de endogamia en uno de los parches. En el tercer capitulo desarrollamos y testamos un marco metodologico basado en la combinacion de herramientas ecologicas (censos de aves y fototrampeo) y geneticas (barcoding) para evaluar la contribucion de los dispersores a la restauracion de campos de cultivo abandonados. Instalamos atractores como puntos de agua y perchas artificiales para atraer las aves a las parcelas abandonadas, y tambien proporcionamos microhabitats y previnimos la herbivoria para incrementar el posible reclutamiento de plantulas. Las estructuras utilizadas incrementaron la llegada de semillas a las areas de estudio, pero no hubo establecimiento de plantulas. Nuestro estudio senalo la importancia de combinar diferentes tecnicas, incluyendo las moleculares, para caracterizar y evaluar el papel de las aves como dispersoras de semillas. En el ultimo capitulo investigamos el impacto de la abeja melifera en las redes de polinizacion bajo un grado variable de uso del suelo e intensificacion apicola. Realizamos muestreos de campo para construir redes de polinizacion, y analizamos los usos del suelo mediante sistemas de informacion geografica y determinamos la carga de patogenos en las abejas mediante la amplificacion por PCR de regiones diana del ADN de microsporidios (Nosema apis y Nosema ceranae). Los resultados revelaron un impacto bajo del uso del suelo en las redes de polinizacion, y corroboraron el impacto de la abeja melifera en las abejas silvestres tambien en ecosistemas semiaridos al promover la dispersion de patogenos en el paisaje. EnglishMutualisms are widespread in natural ecosystems and play a key role in the maintenance of biodiversity and ecosystem services worldwide. Plant-animal mutualistic interactions such as seed dispersal and pollination are fundamental in the reproductive biology of many plants that rely on animals for the pollination of their flowers, the dispersal of their seeds, or both. The study of the functioning of plant-animal mutualistic interactions can be difficult to achieve through classical ecological techniques (e. g. observational studies). These methods can provide skewed results (e. g. different detectability rate of species), and there are some ecological processes that can not be efficiently addressed through classical methods due to their spatial and/or temporal scale (e. g. long-distance dispersal events). The application of indirect techniques such as genetic tools can help to efficiently monitor these interactions. In that sense, the use of molecular tools (e. g. microsatellites) and their application in ecological studies enlarge our knowledge about plant-animal interactions and their associated processes. This thesis is composed by four chapters in which plant-animal mutualisms are studied from different approaches combining ecological and genetic tools and at different geographical scales. In the first chapter, we used microsatellites to analyse the genetic structure patterns of a fleshy-fruited shrub (Pistacia lentiscus) along its entire distribution range spanning the Mediterranean Basin, and the role of long-distance seed dispersal events in such patterns. We found that the foraging movements of migrant frugivorous birds are congruent with the spatial genetic structure of animal-dispersed plants. Therefore, anthropic disturbances and/or climatic changes that might disrupt the migration routes of frugivorous birds could cascade into genetic consequences for the plant species they feed upon. In the second chapter, we studied the effects of extreme fragmentation on the genetic diversity of remnant populations of a bird dispersed fleshy-fruited shrub (P. lentiscus). We also performed microsatellites analyses, and mist-netting and bird census to address our hypotheses. Results revealed a high genetic diversity and a lack of differentiation between shrub patches of P. lentiscus in the area, probably because of a strong, but rather recent fragmentation, despite an apparently poor contribution of birds to the dispersal of Pistacia seeds. However, the existence of latent impacts cannot be discarded, since at least one of the patches showed signs of inbreeding. In the third chapter, we developed and tested a methodological framework based on the combination of ecological (bird census and camera trapping) and genetic tools (DNA barcoding) to assess the contribution of seed dispersers to old fields restoration. We deployed restoration structures as artificial perches and water troughs to attract birds to abandoned cropfields, and we also provided microenvironments and prevented herbivory to increase seedling survival opportunities. The restoration structures deployed proved to be effective for increasing seed arrival to the study areas. However, a subsequent plant establishment has not been observed so far. The study pointed out to the importance of implementing different techniques, including molecular studies, to characterize and assess avian seed disperser performance. In the last chapter, we investigated the impact of managed bees (honey bee) on pollination networks under a variable degree of land use and beekeeping intensity. We conducted field sampling to build pollination networks, and we analysed land use through geographic information systems and pathogen load on managed and wild bees by PCR-amplification of target DNA of microsporidia (Nosema apis and Nosema ceranae). Results revealed a poor impact of land use on pollination networks and corroborated the impact of honey bees on wild bees also in semiarid ecosystems by promoting the spread of pathogens in the landscape.